酶聯(lián)免疫分析中辣根過(guò)氧化物酶HRP有著多種底物,其中新型Trinder’s試劑時(shí)靈敏度高、干擾少的一類(lèi)顯色底物,這類(lèi)試劑有包括TOOS、ALPS、MAOS等十多種類(lèi)型,它們之間有什么區(qū)別呢?
新型Trinder’s試劑是在傳統(tǒng)色原底物苯酚或苯胺的基礎(chǔ)上發(fā)展改進(jìn)而來(lái)的,在傳統(tǒng)色原的基礎(chǔ)上,進(jìn)行一些官能團(tuán)的取代、修飾等,使色原的水溶性、試劑相容性、穩(wěn)定性、顯色產(chǎn)物的最大吸收波長(zhǎng)改變等,德晟科技重點(diǎn)開(kāi)發(fā)了十種色原底物新型Trinder’s試劑。
新型Trinder's試劑TOOS、ALPS、MAOS區(qū)別
我們知道,Trinder’s試劑的檢測(cè)原理都是利用其參與反應(yīng)后生成特定吸收波長(zhǎng)的顯色產(chǎn)物,再用分光光度法測(cè)量在某一特定最大吸收波長(zhǎng)處的吸光度變化,從而分析待測(cè)物的濃度的。那么不同色原底物的顏色反應(yīng)產(chǎn)物最大吸收波長(zhǎng)和吸光強(qiáng)度就決定了色原底物的性能差異。
通過(guò)Trinder反應(yīng)試驗(yàn)我們統(tǒng)計(jì)出:
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明色原底物ALPS, TOOS, TODB,TOPS的顯色產(chǎn)物摩爾吸光度較高,這意味著顏色反應(yīng)的靈敏度較高,既可以進(jìn)行一些血清中很微量的待測(cè)項(xiàng)的測(cè)定。
而色原MAOS與MADB的吸收波長(zhǎng)較高,達(dá)到了630nm,受血清或其它樣本中其他物質(zhì)干擾更小,可以針對(duì)需要高精確值的檢測(cè)項(xiàng)。
另外在顯色產(chǎn)物褪色情況方面,TOOS, ADOS,DAOS所形成的顏色反應(yīng)產(chǎn)物吸光度隨時(shí)間變化不大,即顏色反應(yīng)產(chǎn)物穩(wěn)定,不易褪色。但MAOS的產(chǎn)物則褪色明顯,檢測(cè)時(shí)需及時(shí)觀測(cè)數(shù)據(jù)。
可以將不同Trinder’s試劑的差異總結(jié)如下:
1,TOOS在吸收波長(zhǎng),顏色反應(yīng)強(qiáng)度以及褪色方面均有較好的表現(xiàn),所以TOOS最常用。
2,當(dāng)然,對(duì)于特定待測(cè)項(xiàng),其含量極其微量,那么就需要用到ALPS,TODB 。
3,又如有的待測(cè)項(xiàng)在550nm~600nm,會(huì)有干擾,那就可以選擇MADB,MAOS。
在實(shí)際應(yīng)用中,有些指標(biāo)檢測(cè)對(duì)應(yīng)的新型Trinder’s試劑區(qū)別并不大,可以替換使用,所以可以看到不同公司的診斷原料或試劑盒中檢測(cè)同一項(xiàng)生化指標(biāo)時(shí)運(yùn)用了不同的色原底物。德晟開(kāi)發(fā)的十種色原底物可以滿(mǎn)足不同公司需求。